法测定紫参胶囊中芍药苷的含量

　　HPLC法测定紫参胶囊中芍药苷的含量
　　摘要：建立紫参胶囊中芍药苷的测定方法，采用高效液相色谱法，色谱柱：KromasilC18柱，流动相：乙腈1磷酸溶液（30：70），流速：1。0mlmin1，检测波长：270nm。芍药苷在之间线性关系良好，r0。9998；平均加样回收率为98。9，（n5，RSD0。8）。该方法操作简单，分离效果好，重复性好，可以用于紫参胶囊的质量控制。
　　关键词：紫参胶囊；芍药苷：含量测定；HPLC
　　紫参胶囊是在中医理论指导下研发的新中药复方制剂，由紫河车、太子参、白芍、酸枣仁、茯神等十味中药组成，具有温肾填精，双调阴阳的功效，用于绝经期综合症，闭经，月经不调，不孕症等。芍药苷为方中主药白芍中主要有效成分，但原标准中仅对其定性鉴别没有含量测定方法。为控制产品质量，保证疗效，我们建立了制剂中芍药苷的含量测定方法。
　　DeterminationofPaeoniflorininZishenCapsulesbyHPLC
　　ChengShiYun1，HaoZiXin2
　　（1。AnhuiProvincialInstituteforFoodandDrugControl，hefei，230051；
　　2。AnqingInstituteforDrugControl，Anqing，Anhui）
　　ABSTRACTAHPLCmethodforthedeterminationofpaeoniflorininZishenCapsuleswasestablished。AKromasilC18columnwasuesdwithacetonitrileandwaterandphosphoricacid（30：70：1）asthemobilephase。Theflowratewas1。0mlmin1。Thedetectionwavelengthwas230nm。Thelinearrangewas（r0。9998）andtheaveragerecovetywas（n5，RSD0。8）。Themethodissimpleandsensitivewithgoodseparationefficiency。ItcanbeusedinthestandardofZishenCapsules。
　　KEYWORDSHPLC；ZishenCapsules；paeoniflorin；determination
　　1材料与仪器
　　高效液相色谱仪，紫外检测器。
　　芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：）；紫参胶囊（某医院提供）；甲醇、乙腈为色谱纯，重蒸水，其它试剂为分析纯。
　　2方法与结果
　　2。1色谱条件
　　色谱柱：KromasilC18柱（4。6mm250mm，5m），流动相：乙腈0。1磷酸溶液（15：85），流速：1。0mlmin1，检测波长：230nm，柱温：25；进样量：20l。理论板数：大于。分离度：。
　　2。2溶液的制备
　　2。2。1对照品溶液的制备
　　精密称取芍药苷对照品mg，置ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液ml置ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
　　2。2。2样品溶液的制备
　　取本品20粒的内容物研细混匀，取约g，精密称取，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率5kHz）30分钟，放置至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液即得。
　　2。2。3阴性对照溶液的制备
　　取缺白芍的处方药，按样品溶液制备方法制备阴性对照溶液。
　　2。3线性关系考察
　　分别精密量取对照品溶液（浓度）4，8，12，16，20l注入液相色谱仪，按上述色谱条件在230nm波长处测定，以进样量为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，经回归处理，方程：结果表明，芍药苷进样量在范围内线性关系良好。
　　2。4精密度考察
　　精密吸取同一对照品溶液连续进样5次，每次20l，测定峰面积，RSD为0。6，表明精密度良好。
　　2。5重复性试验
　　精密称取同一批号（）样品5份按供试液制备方法制备，依法测定。结果芍药苷平均含量是mgg1，其RSD为1。2，表明本品测定方法重复性良好。
　　2。6稳定性试验
　　取同一供试品溶液分别在配制后0，2，4，6，8，12，24进样20l，测定峰面积，RSD为1。6，结果显示，供试品溶液在12小时内基本稳定。
　　2。7阴性对照试验
　　取对照品溶液、样品溶液、阴性对照溶液，按本文条件各进样20l，色谱图见图1，在本文条件下，阴性对照无干扰。
　　2。8加样回收率试验
　　精密称取已知含量的同一批（批号：，含量：mgg1）的样品9份，分别精密加入芍药苷对照品ml，按上述含量测定方法测定，结果见表1。
　　表1加样回收率试验结果
　　样品中含量加入量测得总量回收率平均回收率RSD
　　（mg）（mg）（mg）（）（）（）
　　1。50130。4096
　　1。49800。4096
　　1。49020。4096
　　1。5031
　　1。5122
　　1。5072
　　1。4950
　　1。5168
　　1。5036
　　2。9样品含量测定
　　分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20l，注入液相色谱仪，测定峰面积，按外标法计算含量，结果3批样品（批号：）含量分别为mgg1。
　　3讨论
　　对供试品溶液提取条件进行了考察，分别采用甲醇50甲醇作为溶剂，结果以甲醇提取效果较好；另外对提取时间进行考察，结果发现超声提取30分钟即能将芍药苷提取完全。
　　对芍药苷甲醇液进行光谱扫描，在波长230nm处有最大吸收，根据2005年版药典，本文选择测定波长为230nm。
　　芍药苷的含量测定方法已有多篇文献报道〔〕，本文建立的方法具有样品处理简单，本品含量测定理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于时，样品分离良好，重复性好，阴性无干扰，加样回收率高，为完善质量标准提供了方法和依据。
　　〔1〕国家药典委员会。中国药典（一部）〔S〕。北京：化学工业出版社，2005：。
　　〔2〕顾海霞。高效液相色谱法测定孕康口服液中芍药苷的含量〔J〕。安徽医药，2008，12（11）：1051。
　　〔3〕李红，胡静。高效液相色谱法测定固本益肠胶囊中芍药苷的含量〔J〕。中国药事，2007，21（2）：738。
　　〔4〕陈世虎，陈志成。HPLC法测定保胎无忧片中芍药苷的含量〔J〕。中成药，2005，27（4）：470。
　　〔5〕王玉，魏英勤，王伟等。RPHPLC法测定四物汤中芍药苷的含量〔J〕。中成药，2005，27（8）：910。
　　〔6〕孙景卫，丁吕成，贾善学。RPHPLC法测定胃肠舒片中芍药苷的含量〔J〕。中国药师，2005，8（12）：1007。