贝毒有哪些检验方法
贝类毒素又称赤潮生物毒素,是由赤潮生物产生的一系列天然活性物质。对其贝毒需要了解其检验工作,那么贝毒有哪些检验方法?本站给大家详细的讲解一下。
贝毒一共有4种检验方法,下面给大家介绍下这几种检验方法。
1、生物检测法
二十世纪五十年代,小白鼠生物学方法被首先采用于测定PSP和NSP的毒性。该方法是经过一系列的前处理过程(针对水溶性或脂溶性的毒素),将确定为有毒性的部分按不同剂量注射到实验用纯品系的小白鼠腹腔内,观察小白鼠的中毒情况,通过半致死浓度等指标,将致死的鼠单位(Mu)换算成毒素含量。
小白鼠生物学检测法在未知贝毒的发现和研究过程中发挥了巨大作用,在化学方法没有建立以前,作为贝毒检测的常规方法而得到了非常广泛的应用,目前世界上大约有81的国家采用该方法检测DSP和PSP,对于NSP和ASP的检测有的国家仍用该方法。我国目前也采用该方法对贝毒实施检测。但该方法存在着很多不足和缺陷,例如:仅能指出毒性的大小,无法确定毒素的组成和含量;所测得的毒性和小鼠的品系有关,可比性较差,必须进行标准毒素的校准才有可能相比;毒性测定结果的重复性差;毒性测试所需时间长;需要受过专门训练的操作人员;小鼠维持费用较高;对很多脂溶性毒素来说,过多的干扰基质很容易造成假阳性和假阴性;另外,由于动物保护主义的反对,越来越需要其他的方法来替代它。
2、免疫分析法
免疫分析法,如ELISA(酶联免疫吸附检测)、RIA(放射免疫分析)、EIA(竞争性酶免疫分析)以及SPIA(固态免疫珠检测),是以抗原抗体特异性反应原理为基础,将毒素作为抗原注射到兔子等实验动物体内使其产生专一性抗体,然后从其血清中提取抗体,用放射性或荧光物质进行标记,将提取的贝毒或贝类匀浆组织暴露于标记物中,通过检测抗血清抗原混合物中放射性或荧光强度以测定样品中毒素含量的方法。
通常采用的方法为ELISA,酶联免疫方法便宜、快速,适合处理大批量样品,它不需要非常复杂和昂贵的设备,并能够实现自动化。免疫学方法检测贝毒的技术已经得到了初步的发展和应用。但免疫技术和贝毒本身存在的一些问题,如产生抗体的交叉反应、毒素标准品的缺乏,仍然限制着该技术的深入应用。抗体往往只是针对某一种毒素所建立,因而对于其他贝毒常常表现出较低的交叉反应,不能检测所有的贝毒。这对于某一种毒素可能产生假阳性或者过高的估计值,但由于抗体与不同毒素间亲合力的明显差异使得对于总的毒性的评价则可能得到较低的估计值。
3、受体结合检测法
大多数贝类毒素是在细胞水平上通过与细胞表面的受体结合后发挥其生物学活性的。ASP干扰和阻断大脑细胞中谷氨酸酯与乙酰天冬氨酸(AMDA)谷氨酸受体结合;DSP与细胞膜上蛋白磷酸酶(PP2A)结合;PSP与NSP则与细胞膜上钠离子通道受体结合而发挥作用。通过分离ASP、PSP、NSP的受体而建立的放射配体置换检测法已经在相应贝毒的检测和藻类种类鉴定以及在医疗等领域得到了较广泛的应用。
4、细胞毒性细胞培养检测
细胞毒性检测法是建立在贝类毒素对生物细胞产生影响的基础上开发出来的。小白鼠的成神经细胞瘤细胞膜上含有很多钠离子通道,可用于开发PSP、CTX和NSP的检测方法。
细胞毒性细胞培养检测是建立在细胞培养基础上的检测方法,需要特殊的设施和专门人员,繁琐且费用高,比较适用于方法研究,限制了它在一般分析类实验室的使用和作为常规检测方法普及。
所以说贝毒检验方法上面都有介绍,让大家对其海洋灾害小知识有所了解,还应该对其人中贝毒后如何急救等进行了解,这些都可以登录本站进行了解。
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